Kami ngabagi sababaraha pertimbangan minggu kamari pikeun ngagunakeun éléktroforésis mémbran selulosa asétat, sareng kami bakal ngabéréskeun topik ieu di dieu dinten ayeuna pikeun rujukan anjeun.
Pilihan tina Konsentrasi panyangga
Konsentrasi panyangga anu dianggo dina éléktroforésis mémbran selulosa asétat umumna langkung handap tibatan anu dianggo dina éléktroforésis kertas.The ilahar dipaké pH 8,6Bpanyangga arbital ilaharna dipilih dina rentang ti 0,05 mol/L nepi ka 0,09 mol/L.Nalika milih konsentrasi, tekad awal dilakukeun.Contona, upami panjang strip mémbran antara éléktroda dina chamber éléktroforésis nyaéta 8-10cm, tegangan 25V diperlukeun per centimeter panjang mémbran, sarta inténsitas ayeuna kedah 0.4-0.5 mA per centimeter lebar mémbran.Lamun nilai ieu teu kahontal atawa ngaleuwihan salila éléktroforésis, konsentrasi panyangga kudu ngaronjat atawa éncér.
Konsentrasi panyangga anu kaleuleuwihan bakal nyababkeun gerakan anu gancang tina pita sareng paningkatan lebar pita.Di sisi séjén, konsentrasi panyangga anu kaleuleuwihan bakal ngalambatkeun migrasi pita, sahingga hésé ngabédakeun pita pamisahan anu tangtu.
Ieu kudu dicatet yén dina éléktroforésis mémbran selulosa asétat, bagian signifikan tina arus anu dipigawé ngaliwatan sampel, nu dibangkitkeun jumlah considerable panas.Sakapeung, konsentrasi panyangga anu dipilih tiasa dianggap pas.Nanging, dina kaayaan suhu lingkungan anu ningkat atanapi nalika nganggo tegangan anu langkung luhur, évaporasi cai kusabab panas tiasa langkung intensif, nyababkeun konsentrasi panyangga anu kaleuleuwihan bahkan nyababkeun mémbran garing.
Volume Sampel
Dina éléktroforésis mémbran selulosa asétat, jumlah volume sampel ditangtukeun ku rupa-rupa faktor, kaasup kaayaan éléktroforésis, sipat sampel sorangan, métode staining, jeung téhnik deteksi.Salaku prinsip umum, leuwih sénsitip métode deteksi, nu leutik volume sampel bisa jadi, nu nguntungkeun pikeun separation.Lamun volume sampel kaleuleuwihan, pola separation electrophoretic bisa jadi teu jelas, sarta staining ogé bisa jadi waktu-consuming.Sanajan kitu, nalika analisa kuantitatif pita patri dipisahkeun ngagunakeun métode deteksi colorimetric élusi, volume sampel teu kudu leutik teuing, sabab bisa ngahasilkeun nilai absorbance handap pikeun komponén nu tangtu, ngarah kana kasalahan luhur ngitung eusi na.Dina kasus kawas, volume sampel kudu appropriately ngaronjat.
Ilaharna, volume sampel ditambahkeun kana unggal centimeter garis aplikasi sampel rentang ti 0,1 nepi ka 5 μL, sarua jeung jumlah sampel 5 nepi ka 1000 μg.Contona, dina analisis éléktroforésis protéin sérum rutin, volume sampel ditambahkeun kana unggal centimeter tina garis aplikasi umumna teu ngaleuwihan 1 μL, sarua jeung 60 nepi ka 80 μg protéin.Nanging, nalika nganalisa lipoprotein atanapi glikoprotein nganggo metode éléktroforésis anu sami, volume sampel kedah ningkat saluyu.
Dina kacindekan, volume sampel nu paling merenah kudu dipilih dumasar kana kaayaan husus ngaliwatan runtuyan percobaan awal.
Pamilihan Solusi Pewarnaan
Pita anu dipisahkeun dina éléktroforésis mémbran selulosa asétat biasana diwarnaan sateuacan deteksi.Komponén sampel béda merlukeun métode staining béda, sarta métode staining cocog pikeun éléktroforésis mémbran selulosa asétat bisa jadi teu sagemblengna lumaku pikeun kertas filter.
Aya tilu prinsip utama pikeun milih solusi ngawarnaanmémbran selulosa asétat.kahiji,Pewarna larut cai kedah langkung dipikaresep tibatan pewarna larut alkohol pikeun ngahindarkeun mémbran shrinkage sareng deformasi anu disababkeun ku solusi pewarnaan anu terakhir.Saatos ngawarnaan, penting pikeun bilas mémbran ku cai sareng ngaleutikan durasi ngawarnaan.Upami teu kitu, mémbran bisa jadi curled atanapi shrunken, nu bakal mangaruhan deteksi saterusna.
Bréh, éta leuwih hade milih dyes kalawan pangirut staining kuat pikeun sampel.Dina mémbran selulosa asétat Éléktroforésis protéin sérum, amino hideung 10B ilahar dipaké kusabab pangirut staining kuat na pikeun sagala rupa komponén protéin sérum jeung stabilitas na.
Thirdly, dyes kualitas dipercaya kudu dipilih.Sababaraha pewarna, sanaos gaduh nami anu sami, tiasa ngandung najis anu nyababkeun latar tukang poék saatos ngawarnaan.Ieu malah tiasa ngaburkeun pita anu mimitina dipisahkeun, ngajantenkeun aranjeunna hésé ngabédakeun.
Anu pamungkas, pilihan konsentrasi solusi staining penting.Sacara téoritis, sigana yén konsentrasi solusi pewarnaan anu langkung luhur bakal nyababkeun ngawarnaan komponén sampel anu langkung lengkep sareng hasil ngawarnaan anu langkung saé.Sanajan kitu, ieu teu kasus nu bener.Pangirut mengikat antara komponén sampel jeung ngalelep ngabogaan wates nu tangtu, nu teu nambahan jeung kanaékan konsentrasi solusi staining.Sabalikna, konsentrasi solusi pewarnaan anu kaleuleuwihan henteu ngan ukur ngabuang ngalelep tapi ogé nyababkeun sesah pikeun ngahontal latar anu jelas.Leuwih ti éta, lamun inténsitas warna ngahontal nilai maksimum nu tangtu, kurva absorbance ngalelep urang teu nuturkeun hubungan linier, utamana dina measurements kuantitatif.Dina selulosa asétat mémbran Éléktroforésis, konsentrasi solusi staining umumna leuwih handap nu dipaké dina éléktroforésis kertas.
Rinci uninga ngeunaan Beijing Liuyi Biotéhnologi's mémbran selulosa asétattank éléktroforésis jeung aplikasi éléktroforésis na, mangga buka di dieu:
lÉkspérimén pikeun misahkeun protéin sérum ku Mémbran Selulosa Asétat
lÉléktroforésis mémbran selulosa asétat
Upami anjeun ngagaduhan rencana pameseran pikeun produk kami, punten tong ragu ngahubungi kami.Anjeun tiasa ngirim pesen ka kami dina email[email ditangtayungan]atawa[email ditangtayungan], atanapi mangga nelepon kami di +86 15810650221 atanapi tambahkeun Whatsapp +86 15810650221, atanapi Wechat: 15810650221.
Rujukan:Éléktroforésis(édisi kadua) ku Tuan Li
waktos pos: Jun-06-2023