Prinsipna
Éléktroforésis pilem selulosa asétat nyaéta métode éléktroforésis ngagunakeun pilem selulosa asétat salaku pangrojong.Fenomena dimana partikel-partikel bermuatan pindah ka arah éléktroda sabalikna dina pangaruh médan listrik disebut éléktroforésis.Kusabab unggal protéin ngagaduhan titik isoelektrik anu khusus, upami protéin disimpen dina larutan anu pHna langkung handap tina titik isoelektrikna, protéinna bakal bermuatan positip sareng pindah ka arah éléktroda négatip.Sabalikna, éta pindah ka kutub positip.Kusabab laju molekul protéin anu gerak dina médan listrik aya hubunganana sareng muatanana, bentuk sareng ukuran molekul, protéin anu béda-béda tiasa dipisahkeun ku éléktroforésis.Sérum ngandung rupa-rupa protéin, anu sadayana gaduh titik isoelektrik dina pH7,5 atanapi kirang.Nalika sérum disimpen dina panyangga pH 8,6 pikeun ngajalankeun éléktroforésis, sadaya protéin sérum bermuatan négatif sareng bakal ngalih ka sisi positif dina médan listrik.Kusabab rupa-rupa protéin sérum boga muatan béda dina pH sarua, partikel molekular béda dina ukuran, sahingga speed migrasi béda, sarta aranjeunna dipisahkeun ku éléktroforésis.Titik isoelektrik sareng beurat molekul protéin sérum dipidangkeun dina tabel di handap ieu:
| Protéin | Titik isoelektrik (PI) | Beurat molekular |
| Albumin | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulin | 5.12 | 9 000~150 000 |
| γ-gloulin | 6.85~7.50 | 156 000~ 300 000 |
Percobaan nyaéta pikeun misahkeun protéin béda dina sérum getih ku mémbran selulosa asétat (abbr. CAM) salaku média rojongan.CAM mangrupikeun jinis busa busaepilem kalawan seragam alus, sarta ketebalan nyaeta 0.1mm-1.5mm, nu boga nyerep cai tangtu.
Bahan, instrumen sareng réagen pikeun CAM Éléktroforésis
Sampel:sérum getih manusa séhat
Instrumén:catu daya DYY-6C, tank éléktroforésis DYCP-38C, muatan sampel punjul WD-9404
Réagen
1) mémbran selulosa asétat 7X9cm
2) PH 8,6 barbitol solusi panyangga (kakuatan ionik 0,05-0,09, éta 0,06tid waktos.): nyandak 1,84g asam dietil barbituric, lajeng nyandak 1,03g natrium pentobarbital Diethyl, tambahkeun sababaraha cai sulingan panas ngaleyurkeun, sarta nyieun. nepi ka 1000 ml;
3) Kotor: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, tambahkeun 100ml cai sulingan;
4) TBS / T atanapi PBS / T: 45ml 95% étanol, 5ml asam asétat glasial, tambahkeun 50ml cai sulingan;
5) Solusi beberesih: 70ml étanol anhidrat, 30ml asam asétat glasial.
Métode ékspériménd
1) Nyiapkeun mémbran: Neuleumkeun mémbran kana barbitol solusi panyangga 30min-8h, sarta nyandak kaluar, nyabut solusi tambahan ku kertas absorbent.
2) Loading sampel: ngabedakeun sisi kasar jeung sisi lemes tina mémbran, sarta cirian garis dina jarak 1.5cm ka tungtung luhur di sisi kasar.Beban sampel ku alat loading sampel punjul dina sisi kasar.Catetan: Sampel kudu dimuat dina sisi kasar mémbran.Saatos sampel sérum pinuh ditembus kana mémbran, balikkeun mémbran, nempatkeun sisi kasar (kalawan sampel) nyanghareupan handap ka tank, sarta tungtung jeung sampel disimpen dina éléktroda négatip.
3) Éléktroforésis: Hurungkeun catu daya, 0.4～Mémbran 0.6m A / cm, waktos jalanna 30-45 mnt.Sanggeus ngajalankeun éléktroforésis, mareuman kakuatan.
4) Noda jeung bersih: Candak kaluar mémbran tina tank, sarta neuleumkeunit kana leyuran ngalelep salila 5 mnt, terus ngabersihan deui dina leyuran beberesih leuwih jeung leuwih pikeun 3-4 kali nepi ka warna latar jelas.Protéin sérum kedah ditingalikeun dina pita, sareng biasana aya lima zona, ngabentuk tungtung luhur garis anu ditandaan, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Pelestarian: nempatkeun éléktroforésis garingbanddina leyuran beberesih pikeun 10-15 menit, lajeng nyandak kaluar sarta lengket eta dina kaca bersih, sanggeus eta garing, éta bakal jadi pilem transparan.band.
ékspériménHasilna
Pangaruh separation tina sampel sérum téh alus, sarta euweuh fenomena tailing band.Pangulangan hasil béda-béda kusabab prosedur tés sareng metode ékspérimén, sareng kaulanganna luhur.
kacindekan
Sistem deteksi éléktroforésis klinis gancang (Tangki ÉléktroforésisDYCP-38C,sasayogian tanagaDYY-6C jeung sampel punjul loading WD-9404) dihasilkeun ku urangparusahaan Beijing Liuyi Biotéhnologi Co., Ltdminuhan sarat ékspérimén,jeunghasilna reproducible, basajan tur gancang, cocog pikeunpangajaranpanalungtikan.
Beijing LiuyiBiotéhnologi Co., Ltd specializes di manufaktur produk electrtophoresis pikeun industri elmu hirup, nuboga sajarah leuwih ti 50-taun di Cina jeung parusahaan bisa nyadiakeun stabil sarta produk kualitas luhur sakuliah dunya.Ngaliwatan taun pangwangunan, éta pantes pilihan anjeun!
Urang ayeuna pilari mitra, duanana OEM tank éléktroforésis jeung distributor anu tampi.
Kanggo inpo nu langkung lengkep ihwal urang, mangga ngahubungan kami ku email[email ditangtayungan]atawa[email ditangtayungan].
waktos pos: Nov-14-2022