Assay Komet: Téhnik Sénsitip pikeun Ngadeteksi Karusakan sareng Perbaikan DNA

Komet Assay (Sél Tunggal Gél Éléktroforésis, SCGE) nyaéta téhnik sénsitip sarta gancang utamana dipaké pikeun ngadeteksi karuksakan DNA jeung perbaikan dina sél individu. Ngaran "Comet Assay" asalna tina ciri bentuk komet-kawas nu nembongan dina hasil: inti sél ngabentuk "sirah," bari fragmen DNA ruksak migrasi, nyieun "buntut" nyarupaan komet.

3

Prinsipna

Prinsip Assay Komet dumasar kana migrasi fragmen DNA dina médan listrik. DNA gembleng tetep aya dina inti sél, sedengkeun DNA ruksak atawa fragméntasi migrasi ka anoda, ngabentuk "buntut" komét. Panjang jeung inténsitas buntut langsung sabanding jeung extent karuksakan DNA.

Prosedur

  1. Persiapan sél: Sél anu diuji dicampurkeun jeung agarosa titik lebur-rendah sarta sumebar dina slide mikroskop pikeun ngabentuk lapisan seragam.
  2. Lisis sél: The slides anu immersed dina leyuran lisis ngaleupaskeun mémbran sél jeung mémbran nuklir, exposing DNA.
  3. Éléktroforésis: The slides disimpen dina chamber éléktroforésis dina kaayaan basa atawa nétral. fragmen DNA ruksak migrasi ka arah éléktroda positif dina pangaruh médan listrik.
  4. ngawarnaan: Sanggeus éléktroforésis, slides diwarnaan ku ngalelep fluoresensi (misalna, etidium bromida) pikeun visualize DNA.
  5. Analisis mikroskopis: Nganggo mikroskop fluoresensi atanapi parangkat lunak khusus, bentuk komét dianalisis, sareng parameter sapertos panjang buntut sareng inténsitas diukur.

2

Gambar tina biorender

Analisis Data

Hasil tina Assay Komet dievaluasi dumasar kana sababaraha parameter konci:

  • Panjang buntut: Ngagambarkeun jarak DNA migrasi, nunjukkeun extent karuksakan DNA.
  • Kandungan DNA buntut: Persentase DNA nu migrasi kana buntut, mindeng dipaké salaku ukuran kuantitatif karuksakan DNA.
  • Olive Tail Momen (OTM): Ngagabungkeun duanana panjang buntut jeung eusi DNA buntut nyadiakeun ukuran leuwih komprehensif karuksakan DNA.

Aplikasi

  1. Studi Genotoxicity: The Comet Assay loba dipaké pikeun meunteun épék kimia, ubar, jeung radiasi dina DNA sél, sahingga alat konci pikeun nguji genotoxicity.
  2. Toksikologi Lingkungan: Eta mantuan dina nganalisis dampak polutan lingkungan dina DNA organisme, nyadiakeun wawasan kaamanan ékosistem.
  3. Médis jeung Panalungtikan klinis: The Comet Assay dipaké dina diajar mékanisme perbaikan DNA, kanker, sarta panyakit nu patali DNA séjén. Éta ogé ngaevaluasi dampak terapi kanker sapertos radioterapi sareng kémoterapi dina DNA.
  4. Pangan sarta Élmu Pertanian: Dipaké pikeun meunteun kasalametan péstisida, aditif pangan, jeung zat séjén, sarta pikeun ngulik éfék toksikna dina modél sato.

Kaunggulan

  • Sensitipitas tinggi: Sanggup ngadeteksi tingkat low karuksakan DNA.
  • Operasi basajan: Téhnik téh lugas, sahingga cocog pikeun screening-throughput tinggi.
  • Aplikasi lega: Ieu bisa dilarapkeun ka sagala rupa jenis sél, kaasup sél sato jeung tutuwuhan.
  • Tantangan Quantification: Sedengkeun nyadiakeun data kualitatif ngeunaan karuksakan DNA, analisis kuantitatif ngandelkeun pisan kana software jeung téhnik analisis gambar.
  • Kaayaan Ékspérimén: Hasilna tiasa dipangaruhan ku faktor sapertos waktos éléktroforésis sareng pH, anu meryogikeun kontrol ati-ati kana kaayaan ékspérimén.

Watesan

The Comet Assay mangrupikeun alat anu teu ternilai dina panalungtikan biomedis, élmu lingkungan, sareng pamekaran ubar kusabab kalenturan sareng sensitipitas anu luhur dina ngadeteksi karusakan sareng perbaikan DNA. Beijing Liuyi Biotéhnologi Co Ltd (Liuyi Biotéhnologi)nawarkeun chamber éléktroforésis horizontal pikeun assay komet. Wilujeng sumping di kontak sareng kami pikeun ngabahas ngeunaanUji Kometprotokol.

1

Beijing Liuyi Biotéhnologi Co. Ltd (Liuyi Biotéhnologi) geus husus dina manufaktur instrumen Éléktroforésis pikeun leuwih ti 50 taun kalawan tim teknis profésional urang sorangan sarta puseur R&D. Kami gaduh garis produksi anu tiasa dipercaya sareng lengkep tina desain dugi ka pamariksaan, sareng gudang, ogé dukungan pamasaran. Produk utama urang nyaéta Éléktroforésis Sél (tank / chamber), Éléktroforésis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gél Gambar & Analisis System jsb Urang ogé nyadiakeun instrumen lab kawas instrumen PCR, vortex mixer na centrifuge pikeun laboratorium.

Upami anjeun ngagaduhan rencana pameseran pikeun produk kami, punten tong ragu ngahubungi kami. Anjeun tiasa ngirim pesen ka kami dina email[email ditangtayungan]atawa[email ditangtayungan], atanapi mangga nelepon kami di +86 15810650221 atanapi tambahkeun Whatsapp +86 15810650221, atanapi Wechat: 15810650221.

Punten Scan kode QR pikeun nambihan dina Whatsapp atanapi WeChat.

2


waktos pos: Sep-20-2024