Éléktroforésis gél Polyacrylamide
Éléktroforésis gél mangrupikeun téknik dasar di laboratorium dina disiplin biologis, ngamungkinkeun pamisahan makromolekul sapertos DNA, RNA sareng protéin. Média sareng mékanisme pamisahan anu béda ngamungkinkeun sawaréh molekul ieu dipisahkeun sacara efektif ku cara ngamangpaatkeun ciri fisikna. Pikeun protéin hususna, éléktroforésis gél polyacrylamide (PAGE) sering mangrupikeun téknik pilihan.
PAGE mangrupikeun téknik anu misahkeun makromolekul sapertos protéin dumasar kana mobilitas éléktroforétikna, nyaéta kamampuan analit pikeun ngalih ka éléktroda muatan sabalikna. Dina PAGE, ieu ditangtukeun ku muatan, ukuran (beurat molekul) jeung wangun molekul. Analit ngalir ngaliwatan pori kabentuk dina gél polyacrylamide. Teu kawas DNA jeung RNA, protéin béda-béda dina muatan nurutkeun asam amino diasupkeun, nu bisa mangaruhan kumaha aranjeunna ngajalankeun. Senar asam amino ogé tiasa ngabentuk struktur sekundér anu mangaruhan ukuran anu katingali sareng akibatna kumaha aranjeunna tiasa ngalih kana pori-pori. Ku alatan éta, sakapeung jadi desirable pikeun denaturasi protéin saméméh éléktroforésis pikeun linearize aranjeunna lamun estimasi leuwih akurat ukuran diperlukeun.
SDS PAGE
Natrium-dodecyl sulfate polyacrylamide gél éléktroforésis nyaéta téhnik dipaké pikeun misahkeun molekul protéin massa 5 nepi ka 250 kDa. Protéin dipisahkeun ngan ukur dumasar kana beurat molekulna. Natrium dodecyl sulfate, surfaktan anionik, ditambahkeun dina persiapan gél nu masking muatan intrinsik tina sampel protéin jeung mere aranjeunna muatan sarupa ratio massa. Dina kecap basajan, éta denatures protéin jeung mere aranjeunna muatan négatip.
Kaca asli
Native PAGE nyaéta téhnik anu ngagunakeun gél non-denaturasi pikeun misahkeun protéin. Teu kawas SDS PAGE, euweuh agén denaturing ditambahkeun dina persiapan gels. Hasilna, pamisahan protéin lumangsung dina dasar muatan jeung ukuran protéin. Dina téknik ieu, konformasi, lipatan sareng ranté asam amino protéin mangrupikeun faktor anu gumantung kana pamisahan. Protéin teu ruksak dina prosés ieu, sarta bisa pulih sanggeus parantosan separation.
Kumaha éléktroforésis gél polyacrylamide (PAGE) tiasa dianggo?
Prinsip dasar PAGE nyaéta pikeun misahkeun analit ku jalan ngaliwatan pori-pori gél polyacrylamide ngagunakeun arus listrik. Pikeun ngahontal ieu, campuran acrylamide-bisacrylamide dipolimérisasi (polyacrylamide) ku nambahkeun amonium persulfate (APS). Réaksi, nu dikatalisis ku tetramethylethylenediamine (TEMED), ngabentuk jaring kawas struktur jeung liang ngaliwatan mana analit bisa mindahkeun (Gambar 2). Nu leuwih luhur persentase total acrylamide kaasup dina gél, nu leutik ukuran pori, ku kituna leuwih leutik protéin nu bakal bisa ngaliwatan. Babandingan acrylamide mun bisacrylamide ogé bakal mangaruhan ukuran pori tapi ieu mindeng diteundeun konstan. Ukuran pori nu leuwih leutik ogé ngurangan kagancangan nu protéin leutik nu bisa mindahkeun ngaliwatan gél, ngaronjatkeun resolusi maranéhanana sarta nyegah eta ngalir kaluar kana panyangga gancang nalika arus diterapkeun.
Parabot pikeun Polyacrylamide gél Éléktroforésis
Sél Éléktroforésis Gél (Tangki/Kamar)
Tangki gél pikeun éléktroforésis gél polyacrylamide (PAGE) béda ti tank gél agarose. Tangki gél agarose nyaéta horizontal, sedengkeun tank PAGE nangtung. Ku sél éléktroforésis nangtung (tangki / chamber), hiji gél ipis (biasana 1.0mm atawa 1.5mm) dituang antara dua pelat kaca sarta dipasang ku kituna handap gél ieu submerged dina panyangga dina hiji chamber sarta luhur submerged dina panyangga. di kamar sejen. Nalika arus diterapkeun, sajumlah leutik panyangga migrasi ngaliwatan gél ti kamar luhur ka kamar handap. Kalayan jepitan anu kuat pikeun ngajamin rakitan tetep dina posisi tegak, alat-alat ngagampangkeun ngajalankeun gél gancang kalayan pendinginan anu nyababkeun pita anu béda.
Beijing Liuyi Biotéhnologi Co., Ltd. (Liuyi Biotéhnologi) manufactures sauntuyan ukuran sél polyacrylamide gél Éléktroforésis (tangki / chambers). Model DYCZ-20C sareng DYCZ-20G mangrupikeun sél éléktroforésis nangtung (tangki/kamar) pikeun analisis urutan DNA. Sababaraha sél éléktroforésis nangtung (tangki / kamar) cocog sareng sistem blotting, sapertos modél DYCZ-24DN, DYCZ-25D sareng DYCZ-25E cocog sareng sistem Western Blotting modél DYCZ-40D, DYCZ-40G sareng DYCZ-40F, nu dipaké pikeun mindahkeun molekul protéin tina gél ka mémbran. Saatos éléktroforésis SDS-PAGE, Western Blotting mangrupikeun téknik pikeun ngadeteksi protéin khusus dina campuran protéin. Anjeun tiasa milih sistem blotting ieu nurutkeun sarat ékspérimén.
Éléktroforésis Power Supply
Pikeun nyayogikeun listrik pikeun ngajalankeun gél, anjeun peryogi catu daya éléktroforésis. Di Liuyi Biotéhnologi kami nyayogikeun sajumlah catu daya éléktroforésis pikeun sadaya aplikasi. Model DYY-12 sareng DYY-12C kalayan tegangan stabil sareng arus anu luhur tiasa nyumponan éléktroforésis sarat tegangan tinggi. Éta ngagaduhan fungsi nangtung, waktos, VH sareng aplikasi léngkah-léngkah. Éta idéal pikeun aplikasi éléktroforésis IEF sareng DNA sequencing. Pikeun protéin umum sareng aplikasi éléktroforésis DNA, urang gaduh modél DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, sareng saterasna, anu ogé pasokan listrik penjualan panas sareng sél éléktroforésis (tangki / kamar). Ieu bisa dipaké pikeun aplikasi éléktroforésis tegangan tengah jeung low, kayaning pikeun pamakéan lab sakola, lab rumah sakit jeung saterusna. Langkung seueur model pikeun catu daya, mangga kunjungan halaman wéb kami.
Merek Liuyi gaduh sajarah langkung ti 50 taun di Cina sareng perusahaan tiasa nyayogikeun produk anu stabil sareng kualitas luhur di sakumna dunya. Ngaliwatan ngembangkeun taun ', éta pantes pilihan anjeun!
Kanggo inpo nu langkung lengkep ihwal urang, mangga ngahubungan kami ku email[email ditangtayungan] or [email ditangtayungan].
Rujukan pikeun Naon éléktroforésis gél polyacrylamide?
1. Karen Steward PhD éléktroforésis gél Polyacrylamide, Kumaha Gawéna, Varian Téhnik, sareng Aplikasina
waktos pos: May-23-2022