Téhnik Dasar Éléktroforésis Gél Agarose(2)

Persiapan Sampel jeungNgamuat

Alatan pamakéan sistem panyangga kontinyu tanpa stacking gél dina kalolobaan kasus, sampel kudu konsentrasi luyu jeung volume leutik. Paké apipetmun lalaunan nambahkeun sampel, kalawan 5-10 μg per sumur, pikeun nyegah panurunan signifikan dina resolusi. Irahangamuat sampel, catu daya kudu dipareuman. Sampel kedah ngandung pewarna indikator (0,025% bromofénol biru atanapi oranyeu) sareng sukrosa (10-15%) atanapi gliserol (5-10%) pikeun ningkatkeun dénsitasna, konsentrasi sampel, sareng nyegah difusi. Tapi, kadang sukrosa atawa gliserol bisa ngabalukarkeun pita ngawangun U dina hasil éléktroforésis, nu bisa dihindari ku ngagunakeun 2,5% Ficoll (polyvinylpyrrolidone).

1

Éléktroforésis

Tegangan pikeun éléktroforésis nyaéta 5-15 V/cm, umumna kira-kira 10 V/cm. Pikeun pamisahan molekul badag, tegangan kudu leuwih handap, biasana teu ngaleuwihan 5 V / cm.

2

ngawarnaan

Pewarna fluoresensi etidium bromida (EB) biasa dianggo pikeun ngawarnaan pikeun niténan pita DNA dina gél agarose. EB bisa nyelapkeun antara pasangan basa molekul DNA, ngabalukarkeun EB ngabeungkeut DNA. Nyerep sinar ultraviolét 260 nm ku DNA ditransferkeun ka EB, sareng EB anu kabeungkeut ngaluarkeun fluoresensi dina 590 nm di daérah beureum-oranyeu spéktrum cahaya katingali. Ngawarnaan gél dina leyuran 1 mmol/L MgSO4 salila 1 jam bisa ngurangan fluoresensi tukang disababkeun ku EB unbound, facilitating deteksi jumlah leutik DNA.

Pewarna EB ngagaduhan sababaraha kaunggulan: gampang dianggo, henteu ngarecah asam nukléat, gaduh sensitipitas anu luhur, sareng tiasa ngawarnaan DNA sareng RNA. EB bisa ditambahkeun kana sampel sarta dilacak maké nyerep UV iraha wae. Sanggeus ngawarnaan, EB bisa dihapus ku ékstraksi jeung n-butanol.

Nanging, pewarna EB mangrupikeun mutagen anu kuat, sareng pancegahan, sapertos ngagem sarung tangan poliétilén, kedah dilaksanakeun nalika nanganan. Jeruk acridine ogé mangrupa pewarna anu biasa digunakeun sabab bisa ngabédakeun antara asam nukléat untai tunggal jeung asam nukleat untai ganda (DNA, RNA). Éta nunjukkeun fluoresensi héjo (530 nm) pikeun asam nukléat untaian ganda sareng fluoresensi beureum (640 nm) pikeun asam nukléat untaian tunggal. Salaku tambahan, pewarna sanés sapertos métilén biru, métilén héjo, sareng kuinolin B tiasa dianggo pikeun ngawarnaan.

Beijing Liuyi Biotéhnologi Co. Ltd (Liuyi Biotéhnologi) geus husus dina manufaktur instrumen Éléktroforésis pikeun leuwih ti 50 taun kalawan tim teknis profésional urang sorangan sarta puseur R&D. Kami gaduh garis produksi anu tiasa dipercaya sareng lengkep tina desain dugi ka pamariksaan, sareng gudang, ogé dukungan pamasaran. Produk utama kami nyaéta Sél Éléktroforésis (tank / chamber), Pasokan Daya Éléktroforésis, Transilluminator LED Biru, Transilluminator UV, Gél Gambar & Sistem Analisis jsb.

3

Urang ayeuna pilari mitra, duanana OEM tank éléktroforésis jeung distributor anu tampi.

Upami anjeun ngagaduhan rencana pameseran pikeun produk kami, punten tong ragu ngahubungi kami. Anjeun tiasa ngirim pesen ka kami dina email[email ditangtayungan]atawa[email ditangtayungan], atanapi mangga nelepon kami di +86 15810650221 atanapi tambahkeun Whatsapp +86 15810650221, atanapi Wechat: 15810650221.

Punten Scan kode QR pikeun nambihan dina Whatsapp atanapi WeChat.

2


waktos pos: Dec-20-2023